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鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、病毒性关节炎四联灭活疫苗(La Sota株+M41株+VP2蛋白+AV2311株)

研制的鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、病毒性关节炎四联灭活疫苗(La Sota株+M41株+VP2蛋白+AV2311株)中采用的毒株鸡新城疫La Sota株是目前我国通用型标准株,对目前国内新城疫发病保护效果非常好;传染性支气管炎M41株是呼吸型传染性支气管炎的通用型标准株,尽管传染性支气管炎的血清型较多,但该毒株对国内流行的呼吸性传染性支气管炎的保护率仍在70%以上;病毒性关节炎AV2311株是目前我国主要流行的标准毒株,通过试验结果表明,该毒株对国内流行的病毒性关节炎分离株有较好的保护作用。鸡传染性法氏囊病分离株较多,毒力、免疫原性差异较大,我们通过动物回归实验、AGP试验、RT-PCR检测、序列测定及比对等试验,从大量的地方分离株选择了超强毒力、稳定性好、免疫原性好、交叉保护性好的IBDV LN 5/13株(简称L株),以L株病毒基因组核酸为模板,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到VP2基因,用VP2基因构建表达质粒Pet28a-VP2,再将其转化至大肠埃希菌表达,获得了大肠杆菌基因工程菌株E.coli BL21/pET28a-VP2该方法采用国内先进原核表达技术获得VP2蛋白,表达量高,抗原保护效力高,不具有活苗散毒的危险性,生物安全性高,并且经动物实验验证其免疫效价高于活疫苗。

La Sota株、M41株分别接种易感鸡胚培养,AV2311株接种鸡胚成纤维细胞,收获感染鸡胚液和细胞液,超滤浓缩后经甲醛溶液灭活。传染性法氏囊病(VP2蛋白)是用埃希氏大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21/pET28a-VP2接种于适宜LB培养基,经过发酵培养、诱导表达、菌体破碎、离心去除菌体碎片后得到的。这四种抗原按适当比例混合后加入优质油佐剂乳化制成。

生产工艺上实现真正的创新,对疫苗中各种抗原进行浓缩,增强了抗原的免疫原性,使产品质量达到国际标准。

  1. 抗体滴度高,保护力强。714日龄鸡,每只0.3ml免疫,鸡新城疫La Sota株免疫21日测定ND HI抗体均不低于7.5log2;传染性支气管炎M41株免疫21日测定M41 HI抗体均不低于6.5log2;用国内先进原核表达技术获得VP2蛋白,表达量高,抗原保护效力高,免疫21日测定IBD AGP平均抗体均不低于1:16;病毒性关节炎AV2311株免疫21日测定AGP抗体100%阳性。并且经动物试验验证这四种抗原灭活后免疫效价明显高于活疫苗。

  2. 免疫保护期长,效果好。免疫保护力强,受母源抗体影响小、免疫动物后抗体产生快,免疫1个周左右产生抗体疫苗保护力维持时间长,免疫保护期长达6个月以上。攻毒后100%保护。

  3. 本产品具有不散毒,生物安全性好的特点。采用的毒株鸡新城疫La Sota株、传染性支气管眼M41株和病毒性关节炎病毒AV2311株病毒液超滤浓缩后经甲醛溶液灭活用于疫苗的制备,传染性法氏囊病(VP2蛋白)采用原核表达技术获得,疫苗所用抗原不具有活苗散毒的危险性,生物安全性高。

  4. VP2蛋白的纯化采用国际领先技术去除重组蛋白质溶液中内毒素,该方法已申请专利,本方法很好的降低了VP2蛋白中内毒素的含量,大大的降低了疫苗对家禽的免疫应激。

  5. 考虑到生产的实际情况,采用单苗四次免疫费时费工,且对鸡群的应激大,生产性能会受影响,本疫苗采用四联苗,打一针防四种病,省时、省力、省钱,减少对鸡群的应激,提高鸡群的生产性能,很值得推广。

     


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